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（ AB-PAS Stain）

染色原理

中性粘液物質(zhì)含有氨基己糖基，酸性粘液物質(zhì)也含有氨基己糖，并含有各種酸根。者多見于冒粘膜的表面上皮，十二指腸腸腺、下腺和列腺上皮等:后者多見于呼吸道和消化道的杯狀細(xì)胞、主動脈壁、軟骨基質(zhì)、角膜和皮膚等。胃粘膜表面上皮分泌中性粘液，而胃的腸腺化生或腸型胃癌細(xì)胞分泌酸性粘液，但胃型胃癌的癌細(xì)胞則分泌中性粘液。這二種粘液在蘇木素-伊紅染色時(shí)較難區(qū)分，而用(AB-PAS)染色時(shí)酸性粘液可被愛先藍(lán)染為藍(lán)色，中性粘液則可被 PAS染為紅色。

試劑組成

儲存條件及有效期

室溫密封保存，有效期為 12 個(gè)月。試劑二和試劑三應(yīng)用液若本次實(shí)驗(yàn)未用完，需-20C冰

箱冷凍避光保存。下次實(shí)驗(yàn)臨用，需平衡到室溫再使用。

樣本處理

石蠟切片

脫蠟:石蠟切片在脫蠟劑中脫蠟 2 次(-好在 37C氣浴箱中進(jìn)行)，每次 10~15 分鐘。(本

所有無毒環(huán)保拖拉機(jī)供應(yīng))

梯度入水: 95%、70%、30%乙醇各2 分鐘，蒸餾水2 分鐘

染色步驟

玻片法：

1.蒸餾水稍洗樣本，滴加愛先藍(lán)染液染色 10~20 分鐘，水洗 30 左右；

2.將高碘酸染液滴加在玻片的樣本上，使其全部覆蓋樣本，將此玻片輕輕平放于染色架上，

室溫孵育 10 分鐘。

3. 取出染色玻片，蒸餾水洗玻片2~3 分鐘。

4.玻片未完-全干透，滴加雪夫試劑于玻片樣本上，用洗耳球?qū)⑷疽捍祫虿⑷�部覆蓋樣本，

室溫孵育 3~5 分鐘

5. 孵育結(jié)束后，取出染色玻片，自來水流水緩慢沖洗玻片 5 分鐘

6. 滴加蘇木素染色 20~30 ，流水沖凈，待干后鏡檢。建議封片后觀察.

染缸法：

1.蒸餾水稍洗樣本，將玻片放入愛先藍(lán)染液的染缸中染色 10~20 分鐘，水洗 30 左右；

2.將玻片放入裝有高碘酸的染缸中，室溫孵育 10 分鐘。

3.取出染色玻片，蒸餾水洗玻片 2~3 分鐘。

4.玻片未完-全干透，將玻片放入裝有雪夫試劑的染缸中，室溫孵育 3~5分鐘。

5.孵育結(jié)束后，取出染色玻片，自來水流水緩慢沖洗玻片 5 分鐘。

6.放入裝有蘇木素染液的染缸中染色 20~30 ，流水沖凈，待干后鏡檢。建議封片后觀察。

染色結(jié)果

酸性粘液物質(zhì)呈藍(lán)色，中性粘液物質(zhì)呈紅色，混合粘液物質(zhì)呈紫紅色，細(xì)胞核呈淺藍(lán)色。