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原理

免疫測定法以抗原、抗體反應的特異性和親和性為基礎，具有快速、靈敏、簡易的特點。放射免疫法（RIA）是其中發(fā)展較早的一種方法，其靈敏度和準確性均很高，是人體內 EPO 濃度測定的標準方法——初關于人體內正常 EPO 濃度的測定基本上都采用這一方法。90 年代以來，不少學者又結合新技術，對其進行進一步的改進：Roberts-D等人通過血樣的處理，改進常規(guī) RIA 檢測，提高 EPO 檢測的靈敏度。而隨著 EPO-RIA試劑盒的出現(xiàn)，使該方法的操作更加簡易，但由于 RIA 法畢竟涉及放射性元素，對人體不利，所以目具有同樣準確性和靈敏度的非放射免疫法更受廣大學者的青睞。


步驟

放射免疫法主要包括酶免分析法（包含 EIA 與 ELISA）、熒光免疫分析法、化學發(fā)光免疫分析法等。

酶聯(lián)免疫法沒有放射性，并且在顯色機理和方法的選擇上比較靈活（目見于報道的有 ELISA 法）。但由于酶法建立在光度法基礎上，受顯色劑有限的吸光度和動力學范圍的限制，故靈敏度不高。因此 Rossi-R 等在檢測中以單克隆抗體代替以往的多克隆抗體，使酶聯(lián)免疫法的靈敏度得到進一步的提高，對體液中 EPO 含量的檢測達到了 10-11M的靈敏度（與放免法相當）。

熒光免疫檢測（FIA）是非放射免疫法中靈敏度較高的，它常用來檢測含量很低的生物活性物質。近年來利用特殊的熒光探針，建立有效的 FIA 法對 EPO 進行檢測也成為眾多學者關注的點，如從螺旋藻中提取藻膽蛋白作為熒光探針等。

此外化學放光免疫分析（CLIA）是另一個較為活躍的研究域，它具有靈敏度高、本底低的特點。且 CLIA 的靈敏度一般均高于酶免疫分析法。目已有利用 CLIA 原理制成了試劑盒出售。

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