一、物理滅菌方法1、干熱滅菌法
主要是針對金屬器械和玻璃器皿的消毒,將其放入電熱烘箱內(nèi),在150~170℃下維持1~2h后,即可達到滅菌的目的;還有灼燒法滅菌,因其破壞力很強,故只適用于接種環(huán)、接種針的滅菌以及帶病原體材料、動物尸體的焚毀等。
2、濕熱滅菌法
是一類利用高溫的水或水蒸氣進行滅菌的方法,通常多指用100℃以上的加壓蒸汽進行滅菌。在相同的溫度和作用時間下,濕熱滅菌比干熱滅菌更有效,因為濕熱蒸汽不但穿透力強,而且還能破壞維持蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)和穩(wěn)定的氫鍵,即加速這一生命大分子物質(zhì)的變性。
濕熱滅菌法主要有以下幾種:
(1)高壓蒸汽滅菌法
利用水的沸點隨水蒸氣壓力的增加而上升,以達到100 ℃以上高溫滅菌的方法。
方法:121℃維持15-20min。112℃維持20-30min。115℃維持20-30min。
應根據(jù)滅菌物品的性質(zhì)或成分選擇滅菌溫度。
例如:生理鹽水、營養(yǎng)瓊脂等培養(yǎng)基用121 ℃。
含葡萄糖、乳糖、氨基酸等培養(yǎng)基用112 ℃。
適用:耐高溫物品,玻璃儀器、含水或不含水的物品。
(2)間歇滅菌法
將待滅菌物品在80-100℃蒸煮15-60min,冷卻后擱置室溫(28-37℃)下過夜,并重復以上過程三遍以上。
其蒸煮過程可殺死微生物的營養(yǎng)體,但不能殺死芽胞,室溫過夜促使殘留的芽孢萌發(fā)成營養(yǎng)體,再經(jīng)蒸煮過程可殺死新的營養(yǎng)體;循環(huán)三次以上可達到滅菌的目的。
適用于不耐高溫的物品滅菌,如不適于高壓滅菌的特殊培養(yǎng)基、藥品的滅菌。缺點是麻煩、費時。
(3)巴氏消毒法
這是一種用于牛奶、啤酒、果酒或醬油等不宜進行高溫滅菌的液態(tài)風味食品或調(diào)味料的低溫消毒方法。此法可殺滅物料中的無芽孢病原菌,且不影響其原有風味。一般是在60~85℃下處理30分鐘至15。
(4)煮沸消毒法
顧名思義就是在100℃下煮沸數(shù)分鐘的方法,一般用于日常飲用水的消毒。
3、過濾除菌法
采用濾孔比細菌還小的篩子或濾膜作成各種過濾器,當空氣或液體流經(jīng)篩子或濾膜時,微生物不能通過濾孔而被阻留在一側(cè),從而達到滅菌的目的。但不能除去病毒。
實驗室中常用的濾器:
濾膜過濾器、蔡氏過濾器、玻璃過濾器、磁土過濾器等。
過濾介質(zhì):醋酸纖維素膜、硝酸纖維素膜、聚丙烯膜;
以及石棉板、燒結(jié)陶瓷、燒結(jié)玻璃等。
應用:對于含酶、血清、維生素和氨基酸等熱敏物質(zhì)除菌。
4、輻射
紫外線滅菌
使用紫外燈照射,可以根據(jù)1W/M3來計算劑量,若以面積計算,一般30W的紫外燈可用于15M2的房間消毒,照射時間為20—30分鐘,有效照射距離為1米左右。
二、化學殺菌消毒
消毒劑:可以抑制或殺滅微生物,但對人體也可能產(chǎn)生有害作用的化學試劑。—主要用于抑制或殺滅物體表面、器械、排泄物和環(huán)境中的微生物。
防腐劑:可以抑制或阻止微生物生長,但對人體或動物體的毒性較低的化學藥劑。用于肌體表面,如皮膚、粘膜、傷口等處防止感染,也有的用于食品、飲料藥品的防腐作用。
但現(xiàn)時消毒劑和防腐劑間的界限已并不很嚴格。
消毒防腐劑的作用機理一般有下列三種方式:
1、使微生物蛋白質(zhì)凝固變性,發(fā)生沉淀.如酒精等。
2、破壞菌體的酶系統(tǒng),影響菌體代謝.如過氧化氫等。
3、降低微生物表面張力,增加細胞膜的通透性,使細胞發(fā)生破裂或溶解.如來蘇兒等酚類物質(zhì)。