Zamboni固定液:主要由PA、多聚甲醛、磷酸鹽等組成,PA可沉淀蛋白引起組織收縮,但不會使組織硬化, 其與甲醛和乙酸混合后,穿透速度加快,固定均勻,組織收縮輕微,對細胞微細結構顯示很清晰,為一種良好固定液。
規(guī)格:250ml/500ml
保存:室溫
有效期:12個月
說明:固定液分為醛類固定液、汞類固定液、醇類固定液、氧化劑類固定液、苦酸鹽類固定液等,較為常用是醛類中福爾馬林、醇類中乙醇。固定目在于保存細胞和組織原有形態(tài)結構,固定劑能阻止內源性溶酶體酶對自身組織和細胞自溶、抑制細菌和霉菌生長。
操作步驟:(僅供參考)
1. 按實驗具體要求操作。
2. 一般僅需固定30~60min。如果組織塊大,可適當延長固定時間,但不宜超過24h。
3. 固定后組織可稍微流水沖洗或不沖洗直接轉入 70%乙醇脫水,經乙醇脫水時可除去大部分PA,組織留有一點黃色,對染色也無影響。
固定時小妙招:
(1)固定液量:20倍于材料體積,以免固定液被稀釋。
(2)選擇合適固定液:滲透力強固定液既可以迅速進入組織中,又不使組織過度收縮或膨脹。
(3)固定時間要合適:
與材料大小和溫度有關:材料大則時間長,材料小則時間短;溫度高則時間短,溫度低則時間長。
經固定材料如不及時使用,可以經過90%酒精換到70%酒精中各半小時,再換入一次70%酒精,在0-4℃冰箱內可保存半年。經過較長時間保存材料進行觀察可以換新固定液再處理一次,效果較好。
Zamboni固定液