產(chǎn)品名稱:4×蛋白上樣緩沖液(含巰基還原劑)
規(guī)格:10ml
儲(chǔ)存條件:-20℃保存
有效期:12個(gè)月
產(chǎn)品簡介:
本產(chǎn)品適用于 SDS-PAGE(SDS 變性聚丙烯酰胺凝膠電泳)時(shí)作蛋白質(zhì)上樣用。其主要成份為SDS,巰基還原劑,溴酚藍(lán),緩沖鹽溶液等。 SDS 可與蛋白質(zhì)結(jié)合使蛋白質(zhì)-SDS 復(fù)合物上帶有大量的負(fù)電荷,這時(shí)蛋白質(zhì)本身的電荷完全被SDS 掩蓋,消除了各種蛋白質(zhì)本身電荷的差異,SDS 還可以斷開分子內(nèi)和分子間的氫鍵,破壞蛋白質(zhì)分子的二和三結(jié)構(gòu),巰基還原劑可以斷開半胱氨酸殘基之間的二硫鍵,破壞蛋白質(zhì)的四結(jié)構(gòu),消除了蛋白結(jié)構(gòu)之間的差異。終無電荷及結(jié)構(gòu)上差異的蛋白(亞單位),電泳速度只是與其分子量大小有關(guān)。溴酚藍(lán)用作電泳時(shí)的指示劑,可大概指示電泳結(jié)束的時(shí)間。
使用說明(僅供參考):
1. 請按每 30 微升蛋白樣品加入 10 微升上樣緩沖液的比例(4 倍稀釋)來用。如果蛋白濃度過高,可用雙蒸水稀釋。
2. 混勻后,100℃水浴加熱 3-5 分鐘,使蛋白變性。
3. 冷卻到室溫后,10000-14000rpm 離心 2-5 分鐘,取上清直接上樣電泳即可。
注意事項(xiàng):
1. 聚丙烯酰胺凝膠濃度為 8%時(shí)溴酚藍(lán)指示條帶的位置大概在 30kd 左右, 膠濃度 12%時(shí),約在 20kd 左右,膠濃度 15%時(shí),大概在 10kd。請根據(jù)自己目標(biāo)條帶來判斷結(jié)果電泳時(shí)間。
2. 本試劑因含巰基還原劑,有一定的毒性,為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
3、蛋白上樣緩沖液含有溴酚藍(lán)指示劑,PH 值受保存溫度影響,在低溫凍存狀態(tài)下,溶液可能會(huì)呈現(xiàn)深棕色,不影響產(chǎn)品使用。
4、本產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗(yàn)用,不做其他用途。