產(chǎn)品名稱:末端轉(zhuǎn)移酶
其他名稱:末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶
英文名稱:Terminal Transferase
CAS 號:9027-67-2
產(chǎn)品貨號:YX225157
產(chǎn)品規(guī)格:500U
儲存條件:-20℃
分子量:60000
別:BR
來源:大腸桿菌細(xì)胞,含有編碼牛胸腺末端脫氧核苷轉(zhuǎn)移酶基因
濃度:20u/ul
活性定義:是指在37℃、60分鐘內(nèi)將1nmol脫氧核糖核酸摻入多聚核苷酸片段(吸附在DE-81上)所需酶量
酶活性分析混合物:66mM二甲胂酸鉀(PH7.2),1mM CoCL2, 0.01%(v/v) Triton X-100, 10uM oligo(dT)10, 1mM dTTP和0.4MBq/ml[3h]-dTTP
保存液組分:100mM 醋酸-鉀(PH6.8)、2mM β-巰基乙醇,0.01%(v/v) Triton X-100和50%(v/v)甘油
5×反應(yīng)緩沖液:1M 二甲胂酸鉀、125mM Tris,0.05%(v/v) Triton X-100,5mM CoCL2(PH7.2,25℃)
抑制劑:金屬螯合劑、銨、氯化物、碘化物和磷酸鹽離子
失活:加入EDTA,70℃加熱10分鐘
質(zhì)量保證:測試表明無內(nèi)切和外切脫氧核糖核酸酶、核糖核酸酶、磷酸酶污染
注意:由于含有CoCL2,TdT反應(yīng)緩沖液不能與下游應(yīng)用兼容,需采用柱離心法或苯-酚/氯-仿抽提及乙醇沉淀方法純化反應(yīng)混合物,除去CoCL2
性狀:懸浮液,重組酶。
末端轉(zhuǎn)移酶(Terminal transferase, TdT)是一種無需模板DNA聚合酶,催化脫氧核苷酸結(jié)合到DNA分子3'羥基端。帶有突出、凹陷或平滑末端單雙鏈DNA分子均可作為TdT底物。一般操作是:先在載體上打開一單個位點,把它與末端轉(zhuǎn)移酶和某一dNTP(如dATP)一起保溫以使添尾,另一待插入外源DNA-片段則用互補(bǔ)用同法添dNTP(dTTP)用同法添尾。接著使上述兩種都接上互補(bǔ)單鏈尾DNA-片段彼此退火,使形成一雜合載體來轉(zhuǎn)化受體菌。雜合載體中裂隙或切口可被受全菌所修復(fù)。
用途:催化DNA3'末端添加同聚物;DNA3'末端標(biāo)記
本產(chǎn)品僅供科研實驗用,不做其它用途!