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引物設計與合成試驗檢測

產(chǎn)品報價:
0
發(fā)布時間:
2017/8/8 15:09:07
產(chǎn)品特點:
1. 提供引物設計參考序列,設計原理和分析報告,讓您對您引物或探針性能和特點有一個全面了解,便于您對實驗結果認識和分析。
2. 可提供擴增前與處理及擴增后服務:包括,核酸提取,pcr,核酸純化,序列分析,數(shù)據(jù)統(tǒng)計等服務。 引物設計與合成試驗檢測
3. 一次服務,全程保障。
  引物設計與合成試驗檢測的詳細資料:
本產(chǎn)品僅供科研實驗,不得用于醫(yī)療或食用。引物設計與合成試驗檢測

在PCR(聚合酶鏈式反應)技術中,已知一段目基因核苷酸序列,根據(jù)這一序

列合成引物,利用PCR擴增技術,目基因DNA受熱變性后解鏈為單鏈,引物與單鏈相應互補序列結合,然后在DNA

聚合酶作用下進行延伸,如此重復循環(huán),延伸后得到產(chǎn)物同樣可以和引物結合。PCR引物設計目是找到一對合

適核苷酸片段,使其能有效地擴增模板DNA序列。如前述,引物優(yōu)劣直接關系到PCR特異性與成功與否。對引

物設計不可能有一種包羅萬象規(guī)則確保PCR成功,但遵循某些原則,則有助于引物設計。折疊引物*佳設

定區(qū)域

DNA序列保守區(qū)是通過物種間相似序列比較確定。在NCBI上搜索不同物種同一基因,通過序列分析軟件

引物設計與合成試驗檢測

(比如DNAman)比對(Alignment),各基因相同序列就是該基因保守區(qū)。折疊引物長度一般在15~30堿基之間

引物長度(primer length)常用是18-27 bp,但不應大于38,因為過長會導致其延伸溫度大于74℃,不適于

Taq DNA 聚合酶進行反應。折疊引物GC含量在40%~60%間,Tm值近72℃
GC含量(composition)過高或過低都不利于引發(fā)反應。上下游引物GC含量不能相差太大。另外,上下游引物

Tm值(melting temperature)是寡核苷酸解鏈溫度,即在一定鹽濃度條件下,50%寡核苷酸雙鏈解鏈溫度。有效

啟動溫度,一般高于Tm值5~10℃。若按公式Tm= 4(G+C)+2(A+T)估計引物Tm值,則有效引物Tm為

55~80℃,其Tm值接近72℃以使復性條件*佳。引物長度(primer length)常用是18-27 bp,但不應大于38,因

為過長會導致其延伸溫度大于74℃,不適于

Taq DNA 聚合酶進行反應。折疊引物GC含量在40%~60%間,Tm值近72℃

GC含量(composition)過高或過低都不利于引發(fā)反應。上下游引物GC含量不能相差太大。另外,上下游引物

Tm值(melting temperature)是寡核苷酸解鏈溫度,即在一定鹽濃度條件下,50%寡核苷酸雙鏈解鏈溫度。有效

啟動溫度,一般高于Tm值5~10℃。若按公式Tm= 4(G+C)+2(A+T)估計引物Tm值,則有效引物Tm為

55~80℃,其Tm值接近72℃以使復性條件*佳。 

引物設計與合成試驗檢測

更新時間:2024/11/21 11:41:38

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