熒光蛋白上樣緩沖液靈敏度高比銀染高。穩(wěn)定性強，背景低。可對所有蛋白進行染色，不影響蛋白遷移率與電泳圖譜。電泳過程中，游離染料分子與溴酚藍遷移速率一致，跑膠結(jié)束時 移至凝膠末端，背景干凈。熒光蛋白上樣緩沖液非常適合用于追蹤蛋白表達純化以及Western blotSDS-PAGE。
使用步驟    
1.請在使用前根據(jù)管壁標簽上體積加入resuspension buffer重懸。Resuspension buffer在4℃可能會有沉淀產(chǎn)生，室溫下放置至沉淀消失。
2.將用上樣緩沖液處理蛋白樣品與待電泳蛋白樣品1:2混合。比如，3ul 上樣緩沖液 + 6ul 蛋白樣品。
3.90-100℃加熱上述處理樣品混合液5分鐘。細胞或組織樣品，加熱時間延長至10分鐘。確保加熱溫度>90℃使樣品充分受熱。
Ÿ大部分預制膠（Bis-Tris體系除外）可以直接進行下一步。Bis-Tris體系預制膠(如Life Technology)，需加入20%已處理樣品體積Enhancing buffer。比如，10ul已處理樣品需加入2ul Enhancing buffer。
4.樣品可以上樣進行電泳了（無需再加Loading Buffer處理）。
5.電泳結(jié)束后，將凝膠放至透射儀上進行觀察和拍照。透射儀可以是紫外燈，藍光LED燈或其它凝膠成像系統(tǒng)。如果光源在可見光波長范疇無需剝膠，因為可見波長范圍內(nèi)光可以穿透玻璃或塑料材質(zhì)膠板。
6.（可選）如果有需要，經(jīng)熒光蛋白上樣緩沖液處理凝膠仍可進行考染。按標準考染步驟進行即可。

 熒光蛋白上樣緩沖液

注意事項：
1.請勿使用該上樣緩沖液處理預染或預處理蛋白分子量標準。這些產(chǎn)品與熒光蛋白上樣緩沖液不兼容。
2.靈敏度影響因素：高pH（大于7）不會影響染色，低pH則會降低染色效率，如果樣品pH低于5，建議將pH調(diào)整至7以上。
3.熒光蛋白上樣緩沖液不適合在如下SDS-PAGE實驗中使用：切割蛋白條帶用以測序、質(zhì)譜分析或抗體制備。

4.建議-20保存，如果室溫放置2-3周，則可添加新DTT，蛋白條帶會重新變得清晰和明亮。添加DTT終濃度不要超過20 mM。也可以添加其他還原劑TCEP(2 mM)， 效果也很好。

規(guī)格：每個規(guī)格包含3管：Instant-Bands, Resuspension Buffer 和Enhancing buffer。只有使用Bis-tris 膠時才需要加Enhancing Buffer.

 熒光蛋白上樣緩沖液