本產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗(yàn),不得用于醫(yī)療或食用。
游離甲狀腺素(FT4)放免試劑盒
甲狀腺素是由甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞合成和分泌激素。妊shen、哺乳、肝硬化綜合征等可使血清甲狀腺素結(jié)合球蛋白濃度及其結(jié)合力發(fā)生改變,可使游離甲狀腺素濃度發(fā)生變化。
[試驗(yàn)原理]
人體血液中三石典甲腺原氨酸 T3和甲狀腺素 T4絕大部分與甲狀腺結(jié)合球蛋白和白蛋白結(jié)合進(jìn)行循環(huán),但結(jié)合部分激素沒有生物活性,具有生物活性只是極小部分游離激素,即占總?cè)?/span>石典甲腺原氨酸 TT30.3%游離三石典甲腺原氨酸 FT3 和占總甲狀腺素 TT40.03%游離甲狀腺素 FT4。所以血清中 FT3和 FT4濃度更能反映甲狀腺功能狀態(tài)水平。本品采用了第二抗體+聚已二醇沉淀法放射免疫分析試驗(yàn)原理:含游離甲狀腺素(FreeThyroxine)樣品和 125I 標(biāo)記游離甲狀腺素(FT4)與相應(yīng)抗體反應(yīng)形成抗原抗體復(fù)合物。反應(yīng)后加入二抗及 PEG,使免疫復(fù)合物沉淀,離心,測沉淀放射性計(jì)數(shù)。通過標(biāo)準(zhǔn)曲線得到樣本中 FT4濃度。
[實(shí)驗(yàn)方法]
1、 將實(shí)驗(yàn)所需試劑及樣本放置室溫,平衡至少 30 分鐘以上才可進(jìn)行操作;
2、 取 60X12mm 聚苯乙烯管進(jìn)行編號(hào),所有實(shí)驗(yàn)均做雙管重復(fù);
3、 取每個(gè)濃度標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控血清和樣本 50µl 加入相應(yīng)編號(hào)試管中;
4、 每管均各加入 100µl 標(biāo)記物工作液;
5、 除 T、NSB 管外,每管均各加入 100µl 抗體工作液,充分混勻;
6、 37℃溫育 1 小時(shí);
7、 每管均各加入 500µl 分離劑后,充分混勻;
8、 離心 3500 轉(zhuǎn)/分,20 分鐘后,吸去或傾倒掉上清液;
9、 用 γ-計(jì)數(shù)器測定每管 1 分鐘放射性強(qiáng)度計(jì)數(shù);
10、 從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀取樣本及質(zhì)控血清濃度。
[實(shí)驗(yàn)過程中應(yīng)注意]
1、 γ-計(jì)數(shù)器本底計(jì)數(shù)應(yīng)≤100CPM/分,效率應(yīng)≥75%;
2、 加入放射性標(biāo)記物時(shí),應(yīng)做好防護(hù)、小心謹(jǐn)慎,以避免造成放射性污染;
100
100
3、 如果某一個(gè)樣本測定值高于zui高濃度標(biāo)準(zhǔn)品濃度,用零標(biāo)準(zhǔn)品以 1:2 或 1:
4 比例稀釋樣本后重新測試,測試結(jié)果乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。
游離甲狀腺素(FT4)放免試劑盒